WB and IP Lysis Buffer 是一款專為蛋白質免疫印跡(WB)、免疫沉淀(IP)及免疫共沉淀(Co-IP)實驗而設計的溫和型細胞裂解液,適用于動物來源的細胞或組織樣品。裂解液主要成分為25 mM Tris-HCl (pH 7.4)、150 mM NaCl 及 1% Triton X-100,并已預先添加了EDTA、sodium pyrophosphate、β-glycerophosphate、Na3VO4、leupeptin 等多種抑制劑,可有效抑制蛋白降解。
本品能有效溶解細胞膜結構,在釋放胞漿蛋白的同時,完整維持蛋白質的天然構象及其相互作用網絡,為研究蛋白質功能與信號轉導提供了接近生理狀態的反應基礎。由此制備的樣品可直接兼容下游的 WB、IP、Co-IP 及常規PAGE等多種蛋白分析技術。
冰袋運輸,-20℃保存,有效期12個月。盡量避免反復凍融,建議分裝后使用。
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貨號 |
PC101 |
PC102 |
PC103 |
PC106 |
PC107 |
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產品名稱 |
RIPA組織/細胞 裂解液(強) |
RIPA組織/細胞 裂解液(中) |
RIPA組織/細胞 裂解液(弱) |
NP-40裂解液 |
WB and IP裂解液 |
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有效裂解成分 |
Triton X-100 Sodium deoxycholate SDS |
NP-40 Sodium deoxycholate SDS |
NP-40 Sodium deoxycholate |
NP-40 |
Triton X-100 |
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裂解強度 |
強 |
中 |
溫和 |
溫和 |
溫和 |
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膜蛋白提取 |
很好 |
較好 |
一般 |
一般 |
一般 |
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胞漿蛋白提取 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
很好 |
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核蛋白提取 |
很好 |
很好 |
很好 |
一般 |
一般 |
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主要用途 |
WB、IP |
WB、IP |
WB、IP、CO-IP |
WB、IP、CO-IP |
WB、IP、CO-IP |
1.需自備PMSF或選購本司蛋白酶抑制劑(貨號:PC201),磷酸酶抑制劑(貨號:PC202)及蛋白磷酸酶抑制劑(貨號:PC205)。
2.裂解樣品的所有操作應在冰上或4℃環境下進行,以維持蛋白穩定性。
3.推薦使用BCA法測定蛋白濃度,可選用本司Oriscience Ready-To-Use BCA Assay Kit (即用型快速BCA蛋白定量試劑盒)(貨號:PD103)。
4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
5.本產品僅作科研用途。
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下載
Q1:使用WB and IP裂解液提取蛋白時,對核蛋白的檢測效果不理想。
A1:這是正常現象。WB and IP作為一種溫和的非離子去垢劑,其主要作用是裂解細胞膜并釋放細胞質蛋白,而對于核膜及核內結構的裂解能力有限,因此核蛋白的提取效率通常較低。若實驗需要檢測核蛋白,建議在裂解后進行超聲處理(于冰上操作),以破碎細胞核與染色質結構,從而釋放核內蛋白。超聲后離心取上清即可用于后續實驗。請注意優化超聲的功率與時間,避免過度產熱或機械剪切導致蛋白降解。此外,若裂解后產物中出現沉淀或膠狀物,這通常由基因組DNA污染引起,可通過高速離心去除,或進行短暫、溫和的超聲將其打散,以提高蛋白樣品的均一性。