Rhodamine 123（羅丹明123）是一種常用的陽離子熒光染料，具有良好的細胞膜通透性，可特異性在活細胞線粒體內聚集并發出明亮的黃綠色熒光。其作用機制與線粒體膜電位(ΔΨm)密切相關：在正常活細胞中，染料依賴線粒體跨膜電位選擇性進入線粒體基質，熒光強度穩定；當細胞發生凋亡或壞死時，線粒體膜電位丟失，通透性轉換孔(MPTP)持續開放，染料從線粒體釋放，導致熒光強度顯著降低（個別特定條件下可能出現熒光增強，需結合實驗條件驗證）。
該產品無細胞毒性，且與常規蛋白染料（如PE-Cy5、AMCA 等）無熒光干擾，可用于多標實驗。廣泛應用于線粒體膜電位檢測、細胞凋亡檢測，同時因細胞內ATP含量與熒光強度存在相關性，也可用于細胞內ATP水平檢測。本產品為高純度粉末形式，僅用于專業科研用途，嚴禁用于臨床診斷、治療、食品、藥品及化妝品等領域。
粉末：密封干燥，2~8℃避光儲存，可穩定保存2年。
儲存液：-20℃避光分裝保存可穩定6個月；-80℃避光儲存可穩定1年，嚴禁反復凍融。
工作液：現配現用。
1. 避光操作： 全程避光，從儲存、配制到孵育、檢測。
2. 無論是粉末分裝還是儲存液分裝，均需避免反復凍融，否則會導致產品失效。
3. 使用DMSO作為溶劑時，終濃度需< 0.3%（細胞實驗）或< 5%（體內實驗），避免溶劑毒性影響結果。
4. 由于樣本類型和實驗環境的不同均會影響染色效率，建議通過預實驗來優化Rhodamine 123工作液濃度和染色時間。
5. 染色完成后需立即進行后續分析，避免熒光衰減或細胞狀態變化導致結果偏差。
6. 若用于細胞培養，需提前通過0.22 μm濾膜過濾除菌，去除熱原細菌，避免染菌。
pdf
下載
Q1：顯微鏡觀察時，綠色熒光太弱怎么辦？
a. 確認Rhodamine 123工作液終濃度是否為推薦范圍（建議1~20 µM，可從低至高預實驗優化）。
b. 染色時間不足，可延長37℃孵育時間至30~60分鐘。
c. 細胞狀態不佳或膜電位本底偏低，需使用健康傳代的細胞并設置CCCP/FCCP陽性對照驗證。
Q2：背景熒光過高、信噪比差怎么辦？
a. 洗滌不充分，需用預熱的HBSS或完全培養基洗滌2~3次，以去除殘留的胞外染料。
b. 染料濃度過高，可降低Rhodamine 123工作液濃度。
c. 存在大量死細胞，死細胞會非特異性吸附染料，建議染色前評估細胞活率。
Q3：流式細胞圖中細胞群分群不清怎么辦？
a. 細胞碎片過多，需在分析前用細胞篩過濾并正確設門排除碎片。
b. 胰酶消化過度，建議使用溫和消化試劑并嚴格控制時間。
c. 染色不均勻，加入染料后需輕柔混勻。
Q4：細胞在染色后變圓、脫落怎么辦？
a. 錯誤使用了不含Ca²?/Mg²?的緩沖液，全程需使用HBSS或含離子的PBS。
b. 洗滌操作過于劇烈，應輕柔吸棄液體避免直接沖洗細胞。
c. 染料濃度過高產生毒性，需降低工作液濃度并縮短孵育時間。
Q5：實驗結果重復性差怎么辦？
a. 細胞狀態和代次不一致，需統一使用低代次（如15代以內）細胞。
b. 儀器參數漂移，每次實驗前需用同批次陽性對照細胞校準。
c. 染色條件波動，需固定染料孵育時間、溫度及洗滌流程。
Q6：與其它熒光探針（如PI、Hoechst）復用時，信號相互干擾怎么辦？
a. 光譜重疊嚴重，建議核對各染料的激發/發射光譜，使用熒光顯微鏡合適濾光片或流式儀進行光譜補償。
b. 染色順序不當，一般建議先進行活細胞功能染色（如R123），再進行固定或死細胞染色（如PI）。
c. 染料之間存在淬滅或化學反應，建議通過單染對照驗證兼容性，或調整加入順序及孵育條件。
成功加入購物車
全國免費熱線：
郵箱：
