在細胞生物學與分子生物學研究中，細胞核與細胞漿作為細胞最核心的兩大組份，其蛋白的定位、功能及調控機制是解析生命過程的關鍵切入點。細胞核蛋白（如轉錄因子、組蛋白）是轉錄調控、基因表達調控等核心通路的核心參與者，而細胞漿蛋白則承擔著代謝催化、信號傳導等基礎生理功能；對這兩類蛋白的精準分離，不僅是明確蛋白亞細胞定位的前提，更是 EMSA（凝膠遷移實驗）、Footprinting（足跡實驗）等轉錄調控機制研究，以及蛋白互作、活性檢測等下游實驗的關鍵基礎。
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit (Multi-application Type) 細胞核蛋白與漿蛋白提取試劑盒（多應用型﹚提供了一種比較簡單、方便地從新鮮的哺乳動物組織和培養細胞中提取蛋白的方式，約75 min分鐘就可以完成培養細胞的細胞核蛋白與細胞漿蛋白的分離。其核心原理在于通過低滲膨脹-選擇性裂解技術，先用溫和試劑破壞細胞膜釋放胞漿蛋白，同時保持細胞核完整；再經高鹽競爭性解離技術從分離的細胞核中高效提取并穩定轉錄因子等核蛋白，所得蛋白不僅純度高、交叉污染極少，更能完美保持其天然構象與生物活性。抽提到的核和漿蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，報告基因檢測以及酶活力測定等后續操作。
Cytoplasmic Extractio Solution (CES)、Nuclear Extraction Solution (NES)： 4℃保存；100×PMSF：-20℃保存；冰袋運輸 ，有效期12個月。
1. 若PMSF作用有限，可選購本司蛋白酶抑制劑（貨號：PC201），磷酸酶抑制劑（貨號：PC202）及蛋白磷酸酶抑制劑（貨號：PC205）。
2. 可選用本司即用型快速BCA蛋白定量試劑盒（貨號：PD103）與Bradford去垢劑兼容型蛋白濃度測定試劑盒（貨號：PD102）測定蛋白濃度。
3. 據此方法提取到的核蛋白懸浮在一種高鹽緩沖液中，由于僅需少量提取物便足夠用于EMSA、足跡分析等檢測，因此其中的高鹽會被稀釋。如果樣品中的鹽干擾下游實驗，可使用透析脫鹽。
4. 裂解樣品的所有操作應在冰上或 4℃ 環境下進行，以維持蛋白穩定性。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
6. 本產品僅作科研用途。
Oriscience的Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit (Multi-application Type)試劑盒與Y品牌同款試劑盒，同時提取A549蛋白（左，200w個細胞）與小鼠肝臟組織（右，20 mg新鮮組織）的Western Blotting示意圖
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Q1: 使用本試劑盒提取的胞漿與核組分，能達到絕對的零交叉污染嗎？
A1: 在理想狀態下，我們追求完全的分離，但由于生物樣本本身的復雜性（如不同細胞類型的膜結構差異）及操作過程中的物理極限，實現絕對的零交叉污染在技術上非常困難。經過優化，本試劑盒可將交叉污染控制在較低水平。當交叉污染率在10%以下時，其純度已完全滿足絕大多數下游實驗（如Western Blotting、轉錄因子分析等）的要求。
Q2: Western Blotting結果顯示，胞漿提取物中被檢出了核蛋白（如Lamin B1），可能是什么原因？
A2: 胞質組分中出現核蛋白信號，通常意味著在第一步裂解時部分細胞核被破壞。
①可能裂解時間過長：第一次實驗時，建議做裂解時間的梯度優化。
②可能裂解時物理操作過于劇烈：裂解過程中建議輕柔吹打混勻即可，避免劇烈渦旋。
Q3: Western Blotting結果顯示，核提取物中被檢出了漿蛋白（如GAPDH），可能是什么原因？
A3: ①可能裂解不充分，有部分沒破碎的細胞，在提取核蛋白的時候被抽提出來。②可能洗滌時沒洗滌干凈，可以用預冷的PBS在洗滌一次。
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