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RIPA裂解液是一種經(jīng)典的細(xì)胞組織快速裂解液，其名稱“RIPA”源于放射免疫沉淀分析（Radio Immunoprecipitation Assay），主要適用于從動(dòng)物細(xì)胞和組織中提取可溶性蛋白。該裂解液具有多種配方，一般根據(jù)裂解強(qiáng)度可分為強(qiáng)、中、弱三種類型。用于普通的Western、IP，推薦使用RIPA組織/細(xì)胞裂解液（中），裂解細(xì)胞或組織后，沒有非常粘滯的透明狀DNA團(tuán)塊形成，便于后續(xù)操作。對于某些特殊蛋白的IP，CO-IP可以使用較為溫和的裂解液例如RIPA組織/細(xì)胞裂解液(弱) 。如果發(fā)現(xiàn)RIPA組織/細(xì)胞裂解液（中）效果不是非常理想，可以嘗試使用裂解強(qiáng)度更高的裂解液例如RIPA裂解液(強(qiáng))。

RIPA組織/細(xì)胞裂解液（套裝）含有 RIPA組織/細(xì)胞裂解液（強(qiáng)）、 RIPA組織/細(xì)胞裂解液（中）和 RIPA組織/細(xì)胞裂解液（弱）各50 mL，便于實(shí)驗(yàn)時(shí)探索不同的實(shí)驗(yàn)條件。本品已添加金屬離子螯合劑EDTA，但不含廣譜蛋白酶抑制劑。用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，自行添加PMSF、蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑等。

儲(chǔ)存條件

   常溫運(yùn)輸；室溫保存；有效期12個(gè)月。

產(chǎn)品選擇參考

注意事項(xiàng)

1. 需自備PMSF或選購本司蛋白酶抑制劑（貨號(hào)：PC201），磷酸酶抑制劑（貨號(hào)：PC202）及蛋白磷酸酶抑制劑（貨號(hào)：PC205）。

2. 4°C保存時(shí)，可能析出白色SDS或sodium deoxycholate沉淀，使用前請置于37-45℃范圍內(nèi)10-30 min，使其完全溶解，恢復(fù)為澄清透明溶液后再使用。

3. 裂解樣品的所有操作應(yīng)在冰上或 4℃ 環(huán)境下進(jìn)行，以維持蛋白穩(wěn)定性。

4. 經(jīng)RIPA裂解液提取的蛋白樣品，推薦使用BCA法測定蛋白濃度，可選用本司快速BCA蛋白濃度測定試劑盒測（貨號(hào)：PD101）。請注意，由于本品中含有較高濃度的去垢劑，不宜采用 Bradford 法測定蛋白濃度。

5. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

6. 本產(chǎn)品僅作科研用途！

Q1：RIPA 裂解液的裂解產(chǎn)物出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物。

A1：這是正?，F(xiàn)象，該透明膠狀物為含有基因組 DNA 等復(fù)合物。在不檢測和基因組 DNA 結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理（于冰上操作）打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子，例如 NF-kappaB、p53 等時(shí)，通常不必進(jìn)行超聲處理，就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。

Q2：RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物出現(xiàn)細(xì)小白色細(xì)胞團(tuán)塊。

A2：該現(xiàn)象通常為裂解不充分的表現(xiàn)。白色團(tuán)塊主要成分為未被完全裂解的細(xì)胞團(tuán)、細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò)或變性聚集的蛋白質(zhì)。對于多數(shù)可溶性胞漿蛋白和普通膜蛋白的檢測，可通過劇烈渦旋或加強(qiáng)吹打等方式促進(jìn)裂解；若團(tuán)塊仍不消散，建議進(jìn)行短暫超聲處理（于冰上操作），隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。若目標(biāo)蛋白為對機(jī)械剪切力敏感或需保持完整蛋白復(fù)合物結(jié)構(gòu)，則應(yīng)避免超聲，可嘗試適當(dāng)增加裂解液用量并間歇性輕柔吹打，溫和完成裂解，或者選用較溫和的RIPA裂解液。